细胞增殖活力检测
来源:    发布时间: 2013-11-08 23:24   647 次浏览   大小:  16px  14px  12px
增殖活

增殖活力检测
1、WST-1
原理:
WST 在电子耦合试剂存在的情况下,可以被线粒体内的一些脱氢酶还原生成橙黄色的formazan。细胞增殖越多越快,则颜色越深;细胞毒性越大,则颜色越浓。
应用:
对细胞应对生长因子,细胞因子,有丝分裂以及营养而产生增值的检测;
评估生长抑制抗体和生理学介质;
分析细胞毒性和毒杀化合物,例如抗癌药物和其他药理化合物的分析。
WST-1用于细胞增殖和毒性检测典型结果如下:
 
 
货号 品名 规格 价格
5015944001 Cell Proliferation Reagent WST-1 8 ml(800 tests) 1865
11644807001 Cell Proliferation Reagent WST-1 25ml(2500 tests) 3866
CEL-WSTs Cell Proliferation Reagent WST-1 1ml(100 tests) 250

2、alamarBlue
原理:
alamarBlue 按10%的培养基体积加入后,在适当时间点,由于细胞代谢活动,氧化型alarmaBlue 非荧光的靛青蓝转化为还原型荧光的粉色,通过分光光度计辨别颜色的改变或通过荧光光度计辨别荧光的改变来反应细胞的增殖状态或活力。
 
 
优点:不会影响活细胞生长和代谢。
应用:动态检测细胞生长增殖状态、细胞周期、凋亡;
动态检测生长因子活性,对细胞增殖的影响;
治疗性药物尤其是肿瘤治疗药物的开发;
环境污染物质的评估,细胞毒性分析;
抗生素的效价评估;
 
图:alamarblue 使用流程
 
货号 品名 规格 价格
CEL1010 alamarBlue 10ml 600
CEL1025 alamarBlue 25ml 1125
CEL1100 alamarBlue 100ml 3745

 
3、BrdU ELISA 试剂盒
检测DNA的合成是评估细胞增殖时的一种成熟方法,传统方法是用同位素3H,危险性高,我们的产品是用BrdU(5-溴-2'脱氧尿嘧啶)作为底物掺入DNA合成,然后用ELISA的方法检测,安全、简便、效率高。适用于:
 · 检测生长因子和其他细胞因子诱导的细胞增殖;
 · 检测不同化合物对细胞增殖的刺激或抑制作用。
 
 
优势:
·读数和细胞数量的相关性非常好,并且数据稳定;
·和3H一样灵敏,并且线性范围宽(见图);
·固定细胞只需一步,然后进行1次洗涤和2次孵育即可完成实验,简便;
参考文献:
1、APOPTOSIS AND SENESCENCE: Notch and breast cancer: effects of a -secretase inhibitor
on cell cycle. Cancer Res., Jan 2009; 69: 3016.
2、Hydrogen Sulfide Inhibits Proliferation and Release of IL-8 from Human Airway Smooth
Muscle Cells. Am. J. Respir. Cell Mol. Biol., Feb 2011; 10.1165/rcmb.2010-0304OC.
 
货号 品名 规格 价格
11647229001 Cell Proliferation ELISA,BrdU 1000 T 6397
CEL-BRDU Cell Proliferation ELISA,BrdU 96 T 1500
CEL-BRDU-200T Cell Proliferation ELISA,BrdU 200T 3000
 
4、CCK-8
Cell Counting Kit-8简称CCK-8试剂盒,是一种基于WST-8的广泛应用于细胞增殖和细胞毒性的快速高灵敏度检测试剂盒。
WST-8是一种类似于MTT的化合物,在电子耦合试剂存在的情况下,可以被线粒体内的一些脱氢酶还原生成橙黄色的formazan。细胞增殖越多越快,则颜色越深;细胞毒性越大,则颜色越浅。对于同样的细胞,颜色的深浅和细胞数目呈线性关系。
本试剂盒可以用于细胞因子等诱导的细胞增殖检测,也可以用于抗癌药物等对细胞有毒试剂诱导的细胞毒性检测,或一些药物诱导的细胞生长抑制检测。
 
货号 品名 规格 价格
CEL-CCK Cell Counting Kit-8(CCK-8 试剂盒) 500 次 612
 
5、MTT
MTT即Methylthiazolyldiphenyl-tetrazolium bromide,也称Thiazolyl blue tetrazolium bromide,中文名为噻唑蓝。分子式为C18H16BrN5S,分子量为414.32,CAS Number 298-93-1,Ultra Pure Grade。
本产品为黄色至橙黄粉末。常用于基于MTT检测方法的细胞增殖或细胞毒性检测。溶于水或DMSO。常配制成5mg/ml的储备液。
 
货号 品名 规格 价格
CEL-MTT MTT 500mg 200
 
6、LIVE/DEAD Viability/ Cytotoxicity Kit——区分死活细胞
Calcein AM Ester(钙黄绿素乙酰甲酯)分子能自由透过细胞膜,一旦进入细胞,可在各种酯酶的作用下,转化为很强的绿色荧光物质,并且保留在胞内无法扩散出完整的膜结构。所以该类染料既能告诉您细胞的活力,又能提示您细胞的完整性。
除这种活细胞染料外,该试剂盒还包含一种膜不通透的核酸染料ethidium homodimer-1 它能进入破损的细胞膜及核膜并对DNA 进行染色,故可识别死细胞。
这两种染料都是在495nm 处激发,分别在515nm 处(绿)和635nm 处(红)检测。该实验方便迅速,1小时内能够完成,无需洗涤,可用于96 孔板高通量定量检测、荧光显微镜原位检测、以及流式细胞仪。
 
 
 
货号 品名 规格 价格
L3224 Live/Dead viability/cytotoxicity kit 1 kit 5430
7、PI
细胞核荧光染料碘化丙啶(简称PI)是一种常用的细胞核荧光染色剂。它不能透过完整的细胞膜,但PI能透过凋亡中晚期的细胞和死细胞的膜而将细胞核染红,PI在绿色光(535nm波长)的激发下,会在617nm(红色光)处发出明亮的荧光。
 
货号 品名 规格 价格
CEL-PI Propidium Iodide/ 碘化丙啶 5 mg 215
 
8、正常的健康细胞能够排斥台盼蓝,而丧失细胞膜完整性的细胞可以被台盼蓝染色研制而成。严格来说,台盼蓝染色检测的是细胞膜的完整性,通常认为细胞膜丧失完整性,即可认为细胞已经死亡。
    台盼蓝染色后,通过显微镜下直接计数或显微镜下拍照后计数,就可以对细胞存活率进行比较精确的定量。
    台盼蓝染色只需3-5分钟即可完成,并且操作非CFSE
原理
CFDA-SE (简称CFSE,羧基荧光素琥珀酰亚胺酯) 是目前细胞传代研究最为广泛使用的染料,它通过共价结合赖氨酸侧链的氨基而掺入细胞内和细胞表面的蛋白,且结合后发出强的绿色荧光。当细胞分裂时,染料也均匀的分布到子代细胞中;当然随着细胞分裂,子代细胞中的荧光是减半的,这可以在流式细胞术中清楚地观察到。而这种荧光产物能够很好的保持,并且可以用乙醛固定,不会重新泄漏到胞外,可以通过免疫荧光实验或者流式细胞仪定量检测。吸收光和释放光峰值分别在492和517nm。
CFDA-SE (简称CFSE)的优点在于染色更均匀,因此比起核酸染料,它在区分父子代细胞方面效率更高更准确,比如利用流式细胞术,您可以轻易区分8-10代淋巴细胞。
 
 
试剂盒组成:CellTrace™ CFSE (组分A), DMSO (组分B)
您需要准备:
 待测单细胞悬液
 PBS / 0.1% BSA
 5 mM CFSE probe储存液(见说明书)
 细胞培养液
 流式细胞仪(488 nm激发光)
光谱信息:
  CFSE的激发波峰和发射波峰分别为:492 nm和517 nm。标记的细胞可用荧光显微镜或流式细胞仪检测。具体步骤请参考说明书。
 
货号 品名 规格 价格
CEL34553 CFSE cell proliferation kit 50ug 423
CEL34554 CFSE cell proliferation kit 2x 50ug 677
22022 CFSE [5-(and 6)-Carboxyfluorescein diacetate, succinimidyl ester] *Mixed isomers* 25mg 1140
 
9、E-Plate 16
E-Plate 16为一次性耗材,用于xCELLigence RTCA DP上执行基于细胞的分析实验。E-Plate板内的每一个孔的底部都装配有一个镀金电极,可用于动态监测和分析细胞的状态。
 
 
 
 
货号 品名 规格 价格
5469830001 E-Plate 16 (6 plates) 6 plates 2285
5469813001 E-Plate 16 (6x6 plates) 6x6 plates 13301